茜素红染色是一种常用的染色方法，以下是关于它的详细介绍：

原理

茜素红（Alizarin Red S）是一种蒽醌衍生物，能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物，从而用于体外检测组织切片或者培养细胞的钙质变化

操作步骤

以干细胞成骨诱导茜素红染色为例：

吸去培养基并洗涤：在成骨诱导分化结束后，吸去六孔板中的成骨诱导分化完全培养基，用 1×PBS 轻柔洗涤 2-3 次，去除培养基中的成分，为后续的固定和染色做准备。

固定：每孔加入 2mL 4% 多聚甲醛溶液（或 10% 福尔马林），室温固定 30min，以保持细胞形态和结构。

洗涤：吸去固定液，用 1×PBS 轻柔洗涤 2-3 次，确保将固定液清洗彻底，避免对后续染色结果产生干扰。

染色：每孔加入 2mL 茜素红工作液，室温染色 5-10min，具体染色时间需根据镜下可见的聚集钙结节情况来确定，不能仅以诱导时间决定。

洗涤：吸去茜素红染色液，用 1×PBS 轻柔洗涤 2-3 次，充分洗去多余染色液，以获得清晰的染色结果。

观察：每孔加入 2mL 1×PBS，将培养板置于显微镜下观察成骨染色效果，评估成骨组织的形态和钙化区域的分布。

封装和保存：染色后的六孔板用封口膜封装，置于 4℃可保存 2 周，保持染色结果的稳定性和样本的完整性。