众所周知，免疫组化实验中组织固定是很关键的步骤之一，如果没固定好固定到位，就会出现非常多的问题，甚至直接导致最终的实验失败！那如果真的实验中没固定好组织，我们只能直接废掉重做吗？是不是还有什么补救的方法呢？

针对免疫组化实验中组织固定不良问题，确实是还有点办法补救的，只是需要提前提醒一句的是：一旦组织固定不良，补救效果可能并不理想。所以，作为科研人员，不要一直想着出现问题补救，而是要在组织固定的过程中，就严格控制固定剂的浓度和固定时间等实验条件，以保证组织的良好固定效果。并且，此方法补救成功的可能性和技术人员的操作和经验有关，所以建议情况允许的话，可以交给专业的技术人员去操作！

免疫组化实验中，组织固定不良补救措施如下：

1、把已包埋的固定不良的组织重新放入石蜡中融蜡，使组织周围多余的蜡去除；

2、把已除去石蜡的组织放入二甲苯Ⅰ（或环保脱蜡剂）中30分钟，二甲苯Ⅱ30分钟，以去除组织内含有的石蜡；

3、把经过两道二甲苯的组织重新逐级放入乙醇；

4、无水乙醇Ⅰ→无水乙醇Ⅱ→95%乙醇→80%乙醇中各20分钟，此过程应注意各级乙醇应是初次使用，而且不可重复使用，以免已脱蜡的组织又重新沾上乙醇中含有的蜡；

5、如组织已干枯，应在以上程序后水化，应放1%~2%冰醋酸内使组织软化后重新水洗，水洗时间视标本大小确定；

6、把经过各级乙醇浸泡得组织重新放入70%甲醛乙醇溶液中固定；

7、把经过二次处理的组织和下一批标本一起放入脱水机内常规脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。

另外，在免疫组化实验中，针对两个特殊组织的固定也有两个建议！

建议1、骨组织固定的时候，建议非特殊需要，不要使用酸性固定剂，因为这些固定剂会使骨组织加速膨胀，破坏骨组织结构的；

建议2、淋巴结如果取材的是厚度为0.2cm的组织块的话，建议是固定6小时后再制片，效果更好；

文章出自 科研实验外包   想了解更多请关注：http://www.dj-cro.com/